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iTRAQ&TMT

同位素標記定量: 

       iTRAQ(isobaric Tags for Relative and Absolute Quantitation)&TMT(Tandem Mass Tags)分別由AB Sciex公司和 Thermo公司研發的多肽體外標記定量技術,利用多種同位素試劑標記蛋白多肽N末端或者賴氨酸側鏈基團,不同分子量的試 劑對不同來源的樣品進行標記從而實現不同樣品間蛋白質組的比較。 

iTRAQ實驗步驟: 

1.樣品準備:將待測樣品進行定量計算出樣品蛋白濃度; 

2.蛋白還原烷基化及酶解:每組樣品各取100μg按照iTRAQ試劑盒要求進行處理,使用測序級胰蛋白酶溶液酶解后,超濾管 離心收集酶解肽段; 

3.iTRAQ標記:將iTRAQ試劑平衡到室溫,用150μL異.丙.醇溶解,取酶解肽段加入iTRAQ試劑后室溫反應2 h,加入水終止 反應,等量混合不同組樣品,真空冷凍干燥樣品; 

4.LC-MS-MS分析:使用Thermo的Q-Exactive Orbitrap進行串聯質譜鑒定。 

5. 數據處理及生信分析


結果展示:


實驗周期及交付標準 

1.實驗周期:4-6周 

2.交付標準:蛋白定量結果、鑒定結果、質譜原始數據、生信分析結果(GO分析、KEGG分析等等) 

需確認的信息 

1.樣本的種屬 

2.樣本的類型(組織or細胞or血液) 

3.樣本的數量及分組 

4. 分析要求


收費標準/服務周期/提供結果: 

歡迎咨詢詳談,我們會根據您的方案及需求制定詳細的服務協議。 

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【平臺項目開展范圍】慢病毒,腺病毒,RNAi類,分子生物實驗,病理實驗,免疫學實驗,細胞實驗,動 物實驗,蛋白組學實驗,芯片類實驗,并為廣大客戶朋友們提供課題設計指導、基金申請指導、SCI、核 心期刊等服務。 

【碩璽生物】已開展了數千個實驗外包項目。我們專注于醫學課題研究,已從課題申請、方案設計、試劑 采購、模型構造、標本檢測、數據分析、以及對SCI撰寫與發表的支持,各個環節積累了數千個成功案例 經驗,為數千個來自臨床的科研工作者解決了大量的科研問題。更多相關實驗服務信息請咨詢碩璽生物。

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